生物實驗報告

實驗   生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定
一、實驗目的
初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的基本方法。
二、實驗原理
1．還原糖的鑒定原理  生物組織中普遍存在的還原糖種類較多，常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內都含有還原性基團，因此叫做還原糖。蔗糖的分子內沒有遊離的半縮醛羥基，因此叫做非還原性糖，不具有還原性。本實驗中，用斐林試劑隻能檢驗生物組織中還原糖存在與否，而不能鑒定非還原性糖。
斐林試劑由質量濃度為0.1 g／mL的氫氧化鈉溶液和質量濃度為0.05　g／mL的硫酸銅溶液配製而成，二者混合後，立即生成淡藍色的Cu2沉澱。Cu2與加入的葡萄糖在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的Cu2O沉澱，而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下：
CH2OH—4—CHO＋2Cu2→CH2OH—4—COOH＋Cu2O↓＋2H2O
用斐林試劑鑒定還原糖時，溶液的顏色變化過程為：淺藍色   棕色   磚紅色。
2．蛋白質的鑒定原理  鑒定生物組織中是否含有蛋白質時，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質量濃度為0.1 g／mL的氫氧化鈉溶液和質量濃度為0.01 g／mL的硫酸銅溶液。在鹼性溶液中，雙縮脲能與Cu2+作用，形成紫色或紫紅色的絡合物，這個反應叫做雙縮脲反應。由於蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵，因此，蛋白質可與雙縮脲試劑發生顏色反應。
3．脂肪的鑒定原理   脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色，被蘇丹Ⅳ 染成紅色
三、實驗過程
四、實驗用品

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五、註意
1.關於鑒定還原糖的實驗，在加熱試管中的溶液時，應該用試管夾夾住試管上部，並放入盛開水的大燒杯中加熱。註意試管底部不要接觸燒杯底部，同時試管口不要朝向實驗者，以免試管內溶液沸騰時沖出試管，造成燙傷。如果試管內溶液過於沸騰，可以上提試管夾，使試管底部離開大燒杯中的開水。
2.斐林試劑的甲液和乙液混合均勻後方可使用，切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。
3．蛋白質的鑒定中先加雙縮脲A，再加雙縮脲B
六、討論
鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的根據是什麽？